DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE MÉTODO BIOANALÍTICO EM HPLC-FLD PARA ANÁLISE DE CURCUMINA EM PLASMA HUMANO

Resumo

Introdução e objetivos: Estudos pré-clinicos prévios da Curcuma longa destacam importante papel da curcumina no controle dos processos inflamatórios1. Contudo, suas características farmacocinéticas são desfavoráveis justificando a monitorização plasmática em ensaios clínicos2. O presente estudo teve como objetivo desenvolver e validar uma metodologia bionalitica em HPLC-Fluorescência para análise de curcumina em plasma humano. Metodologia: As condições cromatográficas empregaram coluna Luna (C18; 150 4 mm; 3μm) utilizando fase móvel composta por acetonitrila: ácido acético pH 3,2 (45:55 73:27) à vazão de 1 mL/min. Sua detecção foi realizada após excitação a 429/285nm e emissão à 529 nm. As amostras em plasma foram extraídas empregando solução clorofórmica de estradiol (6μg/mL) como padrão interno, com posterior agitação (5 min) e centrifugação (10 min). A fração orgânica foi evaporada sob N2 (10 min) e o resíduo seco reconstituído em ACN, com posterior injeção em HPLC (10μL). Resultados: Os dados obtidos evidenciaram seletividade para curcumina (tR = 7,8 min) e padrão interno (tR = 12,74 min) com elevada recuperação relativa (88,41 %). O método apresentou-se linear no intervalo de 85-1000 ng/mL. O limite de quantificação inferior (LQI) encontrado foi de 85,0 ng/mL. A exatidão (-12,49-0,10%) e a precisão intra-dia (2,89-6,28%) e inter-dias (3,2-9,8%) obtidas em três níveis de concentração (133, 393 e 750 ng/mL) distintos encontram-se em concordância com os critérios estabelecidos pela European Agency of Medicines3. Conclusão: O método bioanalítico apresentou-se seletivo, sensível apto a quantificar amostras com precisão e exatidão garantindo a confiabilidade dos resultados. Agradecimentos: BIOPK, FAPEG, CNPq, FINEP e CAPES.