ESTUDO DE S-NITROSOTIÓIS EM DISPOSITIVOS ANALÍTICOS DE PAPEL COM DETECÇÃO COLORIMÉTRICA

Resumo

Introdução e objetivos: Os S-nitrosotióis são compostos doadores de óxido nítrico1, e o interesse na detecção e quantificação desses compostos em matrizes biológicas está principalmente relacionada com suas funções fisiológicas importantes, vasodilatação2, atividade antimicrobiana3 e fisiopatológicas (doenças neurodegenerativa como Alzheimer). O trabalho teve como objetivos a separação e quantificação de S-nitrosoglutationa, um S-nitrosotiol, de matrizes biológicas em dispositivos analíticos a base de papel com detecção colorimétrica. Metodologia: A S-nitrosoglutationa foi sintetizada a partir de 0,96 g de glutationa reduzida em 5 mL de ácido clorídrico 0,626 M, com agitação constante em banho de gelo. Após a completa dissolução da glutationa reduzida, adicionou-se 0,215 g de nitrito de sódio, mantendo-se a agitação constante por mais 40 min, em banho de gelo. A S-nitrosoglutationa foi precipitada com adição de 5 mL de acetona, lavada com pequenas quantidades de acetona, acetona/água e éter dietílico e filtrada à vácuo. A decomposição catalítica da S-nitrosoglutationa foi realizada através do Cu2+ e glutationa reduzida e também por irradiação UV. Foi preparada uma solução de S-nitrosoglutationa 50 μM em tampão fosfato (0,1 M, pH 7,4) e foi usado o reagente de Griess (Sulfanilamida 300 mM em ácido cítrico 330 mM e N-(1-cloreto de naftil-etilenodiamina) 10 mM). Resultados e discussões: A formação da S-nitrosoglutationa foi comprovada pelo desenvolvimento de cor vermelha-alaranjada durante a síntese e também pelo sólido rosa obtido após a precipitação. Ao adicionar-se o reagente de Griess na solução de S-nitrosoglutationa houve a formação de coloração rosa intenso, confirmando a presença de nitrito. Conclusões: A partir da completa decomposição da S-nitrosoglutationa através de iradiação UV ou Cu2+ e glutationa reduzida é possível detectar nitrito, fato este que foi confirmado pelo método colorimétrico. Agradecimentos: CNPq, INCTBio, IQ-UFG.